產(chǎn)品概述:
Thermo Scientific Bond-Breaker TCEP 溶液(中性 pH 值)是無硫醇的含膦 TCEP 化合物的一種穩(wěn)定 0.5M 溶液,可用作 10X 儲(chǔ)備液,用于添加至 SDS-PAGE 樣品上樣緩沖液以還原蛋白二硫鍵。
Bond-Breaker TCEP 溶液(中性 pH 值)的特點(diǎn):
?無味—與 DTT 和 β-ME 不同,TCEP 無氣味,有助于營(yíng)造更健康的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境
?高效—5 至 50 mM TCEP 可在數(shù)分鐘內(nèi)徹底還原大多數(shù)肽或蛋白二硫鍵(即,與 DTT 一樣高效)
?特異性—甚至可對(duì)極穩(wěn)定的水溶性烷基二硫化物進(jìn)行選擇性和完全還原
?快速—在室溫和 pH 值為 5 的條件下可于五分鐘內(nèi)還原蛋白二硫化物
?穩(wěn)定—耐空氣氧化;非揮發(fā)性,且不會(huì)與蛋白中發(fā)現(xiàn)的其他官能團(tuán)發(fā)生反應(yīng)
?通用—可在廣泛 pH 值、鹽、去污劑和溫度條件下還原肽和蛋白
?兼容—在大多數(shù)應(yīng)用(例如,組氨酸標(biāo)簽蛋白純化、馬來酰亞胺偶聯(lián))前無需去除還原劑,因?yàn)?TCEP 不含有巰基基團(tuán)
Bond-Breaker TCEP 溶液是一種強(qiáng)效、無味、無硫醇還原劑,廣泛應(yīng)用于蛋白和涉及二硫鍵還原的其他研究。本產(chǎn)品是含 B-巰基乙醇或 DTT 的 SDS-PAGE 樣品緩沖液的高效便利替代物。該試劑的中性 pH 值可提供清晰的條帶并避免蛋白暴露于 TCEP·HCl 的強(qiáng)酸,后者可導(dǎo)致水解和碳水化合物改性。
使用 Bond-Breaker TCEP 溶液的注意事項(xiàng):
? 可在廣泛 pH 值(pH 值 4.0-9.0)和溫度(5 至 95°C)條件下進(jìn)行還原。
? 無需使用變性劑即可高效還原大多數(shù)蛋白。然而,加入變性劑(如鹽酸胍)可能有助于將內(nèi)部二硫化物暴露于固定化 TCEP。·
?不推薦將尿素用作變性劑,因?yàn)樗鼤?huì)形成與巰基基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)的氰酸鹽。
?請(qǐng)勿使金屬接觸 TCEP 溶液,因?yàn)檫@會(huì)降低 TCEP 活性。
?在還原過程中,向樣品緩沖液中加入 5 至 20 mM EDTA 有助于防止二價(jià)金屬(如 Zn 2+、Cu 2+ 和 Mg 2+)對(duì)巰基基團(tuán)進(jìn)行再氧化。
?還原樣品應(yīng)在還原后立即使用,因?yàn)槎蚧飼?huì)隨時(shí)間重新形成。