產(chǎn)品概述
Thermo Scientific NAb 蛋白 L 離心柱便于對(duì)各種樣品類型中的抗體進(jìn)行快速、小規(guī)模親和純化。每個(gè)柱包含 5 mL 固定化蛋白樹(shù)脂，可從 2-10 mL 血清或其他樣品中快速純化 5-65 mg IgG。純化的 IgG 實(shí)際量取決于樣品類型和使用的特定離心柱。
Pierce 蛋白 L 瓊脂糖包含已共價(jià)固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的重組蛋白 L。該特殊種類的樹(shù)脂可提供通用的色譜特點(diǎn)組合，用于獲得高得率的目標(biāo)免疫球蛋白和對(duì)目標(biāo)免疫球蛋白進(jìn)行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。
Pierce 蛋白 L 瓊脂糖的特點(diǎn)：
?蛋白 L – 固定化蛋白 L 適用于選擇性純化具有 κ 輕鏈的人和小鼠抗體
? 瓊脂糖樹(shù)脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法的最常用樹(shù)脂
? 惰性且穩(wěn)定 – 優(yōu)越的生產(chǎn)方法通過(guò)不帶電荷的抗浸出性共價(jià)鍵固定蛋白 L，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 標(biāo)準(zhǔn)容量 – Pierce 蛋白 L 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 L，提供 5 至 10 mg 人 IgG/mL 樹(shù)脂的結(jié)合容量
應(yīng)用：
? 純化與蛋白 A 或蛋白 G 瓊脂糖結(jié)合能力較差的單克隆和多克隆抗體
? 從添加牛血清的培養(yǎng)物上清液中純化單克隆抗體
? 蛋白 L 免疫沉淀和免疫共沉淀試驗(yàn)
? 純化 ScFv 和含 κ 輕鏈的 Fab 片段
蛋白 L 是一種源自大消化鏈球菌這種細(xì)菌的免疫球蛋白結(jié)合蛋白 (36 kDa)，但現(xiàn)可通過(guò)重組法在大腸桿菌中生產(chǎn)。與主要通過(guò)免疫球蛋白 Fc 區(qū)（例如：重鏈）結(jié)合的蛋白 A 和蛋白 G 不同，蛋白 L 通過(guò)與輕鏈反應(yīng)來(lái)結(jié)合免疫球蛋白。由于結(jié)合反應(yīng)無(wú)需依靠重鏈的任何部分參與，因此與蛋白 A 和 G 相比，蛋白 L 能夠結(jié)合更廣泛的免疫球蛋白類型。蛋白 L 可與免疫球蛋白的所有代表類型相結(jié)合，包括 IgG、IgM、IgA、IgE 和 IgD。單鏈可變片段 (ScFv) 和 Fab 片段也可與蛋白 L 結(jié)合。
雖然蛋白 L 能夠廣泛結(jié)合多種 Ig 類型，但它并不是通用的免疫球蛋白結(jié)合蛋白。蛋白 L 僅能與含有 κ 輕鏈（即 VL 結(jié)構(gòu)域的 κ 鏈）的免疫球蛋白結(jié)合。人和小鼠的免疫球蛋白以 κ 輕鏈為主。其他免疫球蛋白則以 λ 輕鏈為主。此外，蛋白 L 僅能有效結(jié)合某些亞型的 κ 輕鏈。例如，它能夠結(jié)合人類的 VkI、VkIII 和 VkIV 亞型，但無(wú)法與 VkII 亞型結(jié)合。小鼠免疫球蛋白的結(jié)合局限于具有 VkI 輕鏈的蛋白。
鑒于這些特定的有效結(jié)合要求，固定化蛋白 L 的主要應(yīng)用是從腹水或培養(yǎng)物上清液中純化已知具有 κ 輕鏈的單克隆抗體。蛋白 L 對(duì)于純化培養(yǎng)物上清液中含有 VLk 的單克隆抗體非常有效，因?yàn)樗粫?huì)結(jié)合存在于培養(yǎng)基血清補(bǔ)充液中的牛免疫球蛋白。此外，蛋白 L 不會(huì)干擾抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，使其可用于免疫沉淀試驗(yàn)，即使使用 IgM 也是如此。
Pierce 蛋白 L 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)方法制備而成，與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多種優(yōu)勢(shì)