產(chǎn)品概述:
Thermo Scientific 金黃色葡萄球菌 V-8 蛋白酶,也稱為胞內(nèi)蛋白酶 Glu-C,擁有兩種最佳 pH 值,一種 pH 值為 4.0,另一種 pH 值為 7.8,專門針對(duì)在谷氨酸和天冬氨酸殘基的羧基端裂解。蛋白酶專門僅針對(duì)在任一最佳 pH 值處均不含磷酸鹽的緩沖液中的谷氨酸酶切。pH 值 7.8 的磷酸鹽緩沖液將促進(jìn)在谷氨酸和天冬氨酸殘基處的酶切。
金黃色葡萄球菌 V-8 蛋白酶的特點(diǎn):
?特異性—谷氨酸特異性在碳酸氫銨(pH 值 7.8)或醋酸銨(pH 值 4)中實(shí)現(xiàn)
?活性—在存在多種變性劑(如 SDS、尿素和鹽酸胍)的情況下存在酶活性
金黃色葡萄球菌 V-8 蛋白酶非常穩(wěn)定,即使在 6 M 尿素、5.5 M 鹽酸胍、0.5% SDS 或 0.5% SDS + 6 M 尿素(0°C,pH 值 7.6)中仍能夠保留其活性。這與蛋白酶的天然結(jié)構(gòu)主要通過(guò)靜電相互作用而不是通過(guò)氫鍵合和 β 結(jié)構(gòu)穩(wěn)定這一事實(shí)有關(guān)。
在任何蛋白水解酶切過(guò)程中都存在兩個(gè)重要問題。第一個(gè)問題是必須對(duì)反應(yīng)進(jìn)行猝滅以停止酶切,從而稀釋樣品。第二個(gè)問題是樣品被蛋白酶污染,可能是自動(dòng)酶切的蛋白酶片段。這些問題可通過(guò)固定化 V-8 蛋白酶克服。使用固定化蛋白酶時(shí),無(wú)需淬滅,樣品中的蛋白酶污染或蛋白酶自身消化不會(huì)有問題。只需從瓊脂糖基質(zhì)中分離樣品溶液即可消除這些問題。