如何選擇優質胎牛血清？

　　血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、 多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進 細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。

　　胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。

　　顯然，胎牛血清是品質最高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。

　　胎牛血清 產品描述：

　　1、胎牛血清，是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，其組成成份大部分已知，但還有一部分尚不清楚，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。

　　2、胎牛血清在細胞培養方面通常優于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界， 與新生牛和小牛血清相比，抗體含量明顯降低，故抗體與培養細胞發生交叉反應的風險也較低，是理想的細胞生長補充劑。

　　胎牛血清 功能：

　　1.提供對維持細胞指數生長的激素，基礎培養基中沒有或量很少的營養物，以及主要的低分子營養物。

　　2. 提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結合或調變它們所結合的物質活力。

　　3.有些情況下 結合蛋白質能與有毒金屬和 熱原質結合，起到解毒作用。

　　4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

　　5.起酸堿度 緩沖液作用。

　　6.提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。

　　-20℃，避光。

　　在選擇血清時，應格外留意篩選內毒素：

　　1.養干細胞時，干細胞對內毒素非常敏感，如果血清中內毒素≥3EU/ml時，干細胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過提早審核該批次《檢測報告》，以決定是否入圍進行試用。2.養免疫細胞時，過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細胞集落的形成等。3.基因敲除相關的細胞實驗，培養的細胞要盡可能保持其原始狀態，任何引導細胞衰老或凋亡的試劑，都會讓后續的實驗結果“失之毫厘，謬以千里”。在準備血清和其他試劑時，選擇極低的內毒素(最好≤1EU/ml)，對實驗至關重要;4.原代培養、雜交瘤融合、細胞轉染，或者肝細胞、神經細胞、內皮等難養細胞的擴增，這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此，挑選更低的內毒素，是保證實驗順利的第一步。5.實驗室有些細胞，需要長期培養、長期凍存，或者經常復蘇、經常培養的，血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康，都應該選用更低內毒素的血清，以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。 總之，血清中內毒素含量過高，更容易導致細胞“亞健康”，造成數據不準，或細胞狀態不良、老化、甚至死亡，導致試驗中斷失敗。血清中的內毒素越低越好。

　　內毒素含量越低的血清，級別就越高，以胎牛血清為例：

　　當血清中內毒素含量≤10EU/ml時，此血清為特級胎牛血清;

　　當血清中內毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時，此血清為優級胎牛血清;

　　當血清中內毒素含量≥ 25EU/ml時，此血清為標準級胎牛血清。

　　儲存條件：

　　-20°C凍存。

　　胎牛血清首次解凍后，應按單次習慣用量分裝，分裝后的血清仍-20°C凍存。

　　若置于4°C的血清，應在一周內用完。

　　為保證細胞培養的最佳效果，血清和培養基的配置，應遵循“現用現配”原則。配好的培養液，應于一周內用完。

　　血清避免反復凍融，避免在4°C或更高溫度儲存過久，否則會破壞血清中有效活性成分，影響血清品質。

　　胎牛血清 使用說明：

　　血清從-20℃取出后，融化，按推薦體積加入到基礎培養基中，混勻，制備成新鮮完全培養基。(整個操作需在無菌超凈臺中進行，注意無菌操作。)

　　關于熱滅活：胎牛血清不推薦熱滅活。

　　熱滅活一般是指在做免疫相關的試驗中，通過加熱滅活掉血清中的補體，以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中，由于胎齡原因，尚未形成完整的補體系統，因此，胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。并且，熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減，進而影響細胞培養效果。若針對某些特殊試驗，對于胎牛血清一定要做熱滅活，國際上推薦熱滅活的方法：40℃水浴,20min。