固定化無花果蛋白酶(瓊脂糖樹脂) 貨號: 44881
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規格:
Thermo Scientific Pierce 固定化無花果蛋白酶由巰基特異性蛋白酶(無花果蛋白酶)組成,該酶固定在微珠狀瓊脂糖樹脂上,以實現受控的抗體片段化(尤其是小鼠 IgG1)。
Pierce 固定化無花果蛋白酶的特點:
?可從小鼠 IgG1 中生成 Fab 和 F(ab')2 片段
?反應可輕松控制
?抗體片段不含自身消化產物
?消除無花果蛋白酶對抗體片段的污染
無花果蛋白酶與木瓜蛋白酶相似,是一種從無花果乳膠中分離出的非特異性、巰基蛋白酶。無花果蛋白酶的分子量約為 25,000,在 pH 值 4-9.5 下有效,最佳 pH 值為 6.5。在存在半胱氨酸的條件下將 IgG 分子與無花果蛋白酶一起孵育時,鉸鏈區的一個或多個肽鍵分離,產生 Fab 片段或 F(ab')2 片段。使用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶明顯難以將小鼠 IgG1 酶切為功能性 Fab 或 F(ab')2 片段,然而,得率和免疫反應性優于使用無花果蛋白酶酶切小鼠 IgG1。固定化無花果蛋白酶專門設計用于將小鼠 IgG1 切割為 Fab 或 F(ab')2 片段,且具有優勢,因為它幾乎無需自溶、消除了樣品中的蛋白酶污染,還可以通過去除無花果蛋白酶或控制樣品在固定化無花果蛋白酶柱中的流速來控制酶切。
固定化無花果蛋白酶與游離酶相比能夠更加穩定地抵抗熱誘導的變性,從而延長活性維持時間。Fab 和 F(ab')2 制備試劑盒包含固定化無花果蛋白酶、其他必要試劑和用于小鼠 IgG1 酶切的優化方案。無花果蛋白酶分別在存在 1 mM 半胱氨酸和 10 mM 半胱氨酸的條件下生成小鼠 IgG1 F(ab')2 和 Fab 片段。通過修飾半胱氨酸濃度和其他酶切參數,也可以從其他物種和同種型中生成片段。
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